PH0101 | PhyScript™ Taq DNA Polymerase / PhyScript™ Taq DNA聚合酶

储存条件： 冰袋运输，-20℃保存，有效期至少12个月

产品简介

Taq DNA Polymerase 是从克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为 94 KD。该酶具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’核酸外切酶活性，无 3’-5’外切酶活性。在 PCR 反应中，Taq DNA Polymerase 延伸速度为 1-2 kb/分钟，产物 3’端带 A，可直接用于 T/A 载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组 DNA 的污染，稳定性好，特异性强。

活性定义

1 单位(U) Taq DNA Polymerase 活力定义为在 74℃，30 分钟内，以活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板，将 10 nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制

SDS-PAGE 检测 Taq DNA Polymerase 纯度大于 99%；经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余 DNA；能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

酶贮存缓冲液：20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol

10×Taq Buffer：200mM Tris-HCl (pH 8.4); 200mM KCl;15mM MgCl2; 其它成分。

适用范围：用于小于 6kb 的对保真度要求不高的 DNA 片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定、平末端加 A 等，产物可以直接用于 T/A 载体克隆。

建议 PCR 条件：

PCR 体系（以 50μl 反应体系为例）

Template <0.5μg

上游引物（10μM） 1μl

下游引物（10μM） 1μl

10×Buffer（含 Mg2+） 5μl

dNTP（各 2.5mM） 4μl

Taq DNA Polymerase 0.5-1μl

ddH2O up to 50μl

注意事项

1、PCR 反应体系加样时，最后一步加入 Taq DNA Ploymerase，整个过程宜在冰上操作。

2、取 Taq DNA Ploymerase 做 PCR 反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。

3、10×Taq Buffer 分为含 15 mM Mg2+和不含 Mg2+两种，不含 Mg2+的 Buffer，另外配有 25 mM MgCl2。如果没有特别指定，通常提供的为含有15 mM Mg2+的 Buffer。